真菌菌种保存全攻略：方法、步骤与注意事项

1. 将真菌接种在带螺口盖的玻璃管PDA斜面培养基，置于25℃培养2周，向培养管内加入6~7ml 的无菌蒸馏水。

2. 使用移液器枪头在斜面上轻轻刮取孢子或菌丝片段，收集上清悬液并转移至无菌的带螺口瓶内。

3. 将瓶盖旋紧，以防止水分的蒸发，如发生蒸发可定期添加无菌蒸馏水，在瓶上做好标记储存于室温。

无菌条件下从瓶内吸取0.3ml悬液接种至SDA或PDA斜面，于25℃培养3周，定期观察生长情况3周后如无生长，或重复转种培养后仍无生长，表明保种物无活性。

1. 将真菌接种在带螺口盖的聚丙烯管PDA斜面培养基，置于25℃培养2周。

2. 旋紧瓶盖，置于冷冻冰箱(-20℃以下)。

注意： 培养管自冰箱取出后应尽快操作，避免融化，尽快放回冰箱，否则影响真菌的存活率

1. 准备高等级的矿物油，121℃高压15min。

2. 将真菌接种在带螺口盖的玻璃管PDA斜面培养基，置于25℃培养2周。

3. 向培养管内加入矿物油，以矿物油高出斜面1cm为宜，确保培养管的斜面和所有菌落完全被浸没。

4. 将培养管直立放置于室温，定期观察矿物油水平及含量，必要时适量添加。
   

从保种培养斜面挑取小量菌落接种至适当的培养基(PDA或SDA)，取菌时尽量沥去矿物油。由于菌落黏附矿物油，菌落的生长速度会较慢，可能需要传代多次。理想的操作方法可以将菌落接种在斜面培养基的中点，可以使多余的矿物油流至管底。