“
尺寸排阻色谱（SEC），是一种对分子量大于2000的物质按其分子尺寸大小进行分离的技术，
该技术基于样品中各组分的体积大小，而非化学亲和力进行分离，
广泛应用于合成聚合物、生物大分子，尤其是蛋白、核酸等的分离和表征鉴定
。
”
SEC是利用多孔材料颗粒作为固定相，这些颗粒内部有不同大小的孔隙。
当样品通过色谱柱时，小分子能够进入并穿过大的微孔和小的微孔，而大分子由于体积较大，有的无法进入孔隙，只能在颗粒之间的空隙中流动，稍微小一些的只能进入大的微孔，因此体积不同的分子经过的路径长度不同。
大分子物质先于小分子被洗脱出来，实现了按分子大小顺序的分离。
SEC固定相，根据材质的机械强度不同，分为三类：软质凝胶、半刚性凝胶和刚性凝胶。
软质凝胶，包括交联葡聚糖、琼脂糖和聚丙烯酰胺，由于施压下很不稳定，只能在低压、低流速下运行，且由于自身的溶胀和收缩会导致渗透率和分离效率的下降，因此不适宜在高柱压下使用，洗脱流动相是水相洗脱。
半刚性凝胶，是具有高交联度的苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物。洗脱流动相是有机溶剂，一般可承受压力10Mpa。
刚性凝胶，一般为多孔球形硅胶，洗脱流动相往往用水相，机械强度较高，粒径5-10微米，可耐压50Mpa。
凝胶渗透模式（固定相聚苯乙烯-二乙烯基苯），流动相常用四氢呋喃，四氢呋喃虽然是一个较理想的凝胶渗透色谱适用的溶剂，但是四氢呋喃很容易在贮存过程生成过氧化物，特别在日光照射下形成的更快；当蒸馏四氢呋喃时应有防护罩，并应留下十分之一时停止蒸馏，如若蒸干会引起爆炸，使用时要特别注意。
凝胶过滤色谱（交联葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、硅胶），流动相以水作基体具有不同pH值的多种缓冲溶液，并加入无机盐，如 ：氯化钠、氯化钾等，以维持流动相的离子强度为 0.1-0.5，以减少其他不必要的相互作用力。
在SEC方法中，填料的性质必须与溶质和淋洗体系相匹配。待分离的样品可能是脂溶性的，也可能是水溶性的，脂溶性的样品只能在有机体系中分离，水溶性的只能在水相体系中分离，填料必须被流动相所浸润。
SEC方法要求填料与样品尽可能不发生任何基团的相互作用，即在分离过程应尽可能避免非体积排阻效应（如吸附、离子交换、分配等相互作用）的影响，而是完全按照分子尺寸大小进行分离，可以通过调节pH或增大盐浓度来实现。再有填料的多孔结构是SEC方法赖以建立的基础，必须有较大的孔径以及适当的孔径大小分布。
往期文章
从小白开始学色谱之制备色谱
从小白开始学色谱之气相色谱柱构造
从小白开始学色谱之液相色谱柱构造
从小白开始学色谱之质谱
从小白开始学色谱之手性分离
从小白开始学色谱之离子交换色谱
从小白开始学色谱之实验前准备
从小白开始学色谱之色谱名词
从小白开始学色谱之液相色谱简单操作
从小白开始学色谱之色谱原理
从小白开始学色谱之液相色谱系统
从小白开始学色谱之色谱分类
从小白开始学色谱之色谱的由来
