在液相色谱分析领域，方法学验证是确保所开发方法科学性、可靠性与实用性的关键步骤，它如同给色谱方法披上一层坚实的 “质量铠甲”，保障实验数据准确无误，能经得起反复推敲。
一、线性考察
线性验证旨在探究分析物浓度与检测响应值之间的关联是否呈理想的直线关系。首先，需精密配制一系列涵盖预期样品浓度范围的标准溶液，浓度点通常不少于5个，且应均匀分布。例如在测定药物有效成分含量时，若预估成品药中该成分含量在10%-50%之间，可配制10%、20%、30%、40%、50% 等不同浓度梯度。将各标准溶液依次注入液相色谱仪，记录对应的峰面积或峰高。随后，以浓度为横坐标、响应值为纵坐标绘制标准曲线，通过线性回归分析计算相关系数（R），一般要求 R 值不低于 0.995，越接近 1 表明线性关系越好，这意味着在该浓度区间内，可依据标准曲线精准定量未知样品中的目标物。
二、精密度测试
精密度反映了方法在重复性操作条件下的稳定性。重复性是在短时间内，由同一操作人员、使用同一台仪器、相同色谱条件对同一批样品进行多次连续进样测定，通常重复进样6次及以上。计算每次进样目标峰的峰面积或峰高的相对标准偏差（RSD），对于含量测定方法，RSD一般要求控制在 2%以内，杂质测定时相对宽松，但也多控制在10%以下，RSD值越小说明重复性越好，仪器和方法的短期稳定性越高。中间精密度则拓展了实验条件，考察不同日期、不同操作人员、不同仪器对结果的影响，同样通过计算 RSD 评估，确保方法在常规实验室变动因素下仍能输出稳定可靠的数据。
