专栏名称: 色谱
简单有效地分享色谱相关知识、案例、经验
目录
相关文章推荐
51好读  ›  专栏  ›  色谱

固相萃取不同模式的操作方法

色谱  · 公众号  ·  · 2024-07-28 20:10

主要观点总结

文章介绍了固相萃取(SPE)的四种主要分离模式:反相固相萃取、正相固相萃取、离子交换萃取和免疫亲和萃取。文章详细描述了每种分离模式的操作方法,包括活化、上样、淋洗、洗脱等步骤,并强调了选择合适的溶剂、控制流速和优化洗脱条件的重要性。文章还指出,每种分离模式的选择和优化需基于目标化合物的化学性质和样品基质的特点。

关键观点总结

关键观点1: 固相萃取的主要分离模式

文章介绍了固相萃取的四种分离模式:反相、正相、离子交换和免疫亲和萃取,每种模式都有其特定的吸附剂、流动相和作用机理。

关键观点2: 不同分离模式的操作方法

文章详细描述了每种分离模式的操作步骤,包括活化、上样、淋洗和洗脱,这些步骤对于提高目标化合物的回收率和纯度至关重要。

关键观点3: 选择合适的溶剂和优化洗脱条件的重要性

文章强调了选择合适的溶剂、控制流速和优化洗脱条件在提高目标化合物回收率和纯度方面的重要性。这也是提高固相萃取效率的关键。

关键观点4: 需要根据实际情况选择分离模式

文章指出,每种分离模式的选择和优化需基于目标化合物的化学性质和样品基质的特点,需要根据经验和实际样品情况进行选择。


正文

戳蓝字“ 色谱 ”关注我们哦!

固相萃取(SPE)是一种高效的样品预处理技术,通过不同的分离模式来适应不同极性目标化合物的分离和富集。主要的分离模式包括反相固相萃取和正相固相萃取,此外还有离子交换萃取和免疫亲和萃取等。以下是这些模式的操作方法:

1. 反相SPE
- 吸附剂: 非极性或弱极性,如C18、C8键合硅胶。
- 流动相: 水或水-有机溶剂。
- 作用机理: 非极性相互作用。
- 操作步骤:
活化:先有机相,后水相;
②上样:大比例水相;
③淋洗:适当比例有机相;

④洗脱:大比例有机相。

2. 正相SPE
- 吸附剂: 极性键合相,如硅胶或硅胶键合NH2、CN、Diol,或硅藻土。
- 流动相: 非极性和极性有机相搭配。
- 作用机理: 极性-极性相互作用。
- 操作步骤:
①活化:先强极性有机相,后弱极性有机相
②上样:弱极性有机相

③淋洗:适当比例强极性有机相

④洗脱:强极性有机相


3. 离子交换SPE
- 原理: 利用离子交换树脂对样品中带电离子的吸附。
离子交换模式包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换、弱阴离子交换。
- 操作:
离子交换模式(强阳,弱阴)

①活化:先有机相,后水相(酸性)

②上样:大比例水相(酸性)

③淋洗:适当的有机相

④洗脱:大比例有机相(碱性)

离子交换模式(强阴,弱阳)

①活化:先有机相,后水相(碱性)

②上样:大比例水相(碱性)

③淋洗:适当的有机相
④洗脱:大比例有机相(酸性)

4. 免疫亲和SPE
- 原理: 利用特异性抗体或抗原与目标分子的特异性结合。
- 操作:
- 活化: 特定条件下的抗体/抗原预激活。
- 上样: 样品与抗体/抗原结合。
- 洗脱: 使用特定条件(如改变pH或添加竞争性配体)释放目标分子。






请到「今天看啥」查看全文