CD30也被称为ki -1或TNFRSF8，于1982年首次使用源自霍奇金淋巴瘤（HL）细胞系的单克隆抗体进行鉴定，为120kD跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族，存在于细胞内、跨膜和细胞外域
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。CD30在一小部分活化的T淋巴细胞和B淋巴细胞以及各种淋巴样肿瘤上表达，经典型霍奇金淋巴瘤（classical Hodgkin's lymphoma，cHL）和间变性大细胞淋巴瘤（anaplastic large-cell lymphoma，ALCL）近乎100%的肿瘤细胞表达CD30，因此CD30成为cHL和ALCL诊断的常规标志物，此外CD30在其他淋巴瘤亚型中也具有不同程度的表达，除了是重要的诊断标志物，CD30目前已经成为靶向治疗的重要靶标
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。因此CD30的检测也越来越受到临床医师和病理医师的重视。
CD30的检测通常有三种方法：免疫组化染色（IHC），流式细胞术（FCM）或可溶性CD30的酶联免疫吸附试验，或单独使用，或联合使用
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石蜡包埋福尔马林固定切片免疫组化检测CD30是最常用的方法
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获取检测标本 ➝ 标本前期处理 ➝ 免疫组化染色 ➝ 染色过程的质控 ➝ 结果判读
接下来介绍CD30免疫组化流程的各个步骤对最终结果的影响
坏死组织中几乎所有的细胞细节都会丢失了，大多数免疫染色要么失败，要么给出误导性的、非特异性的阳性结果
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淋巴瘤CD30的表达可能还存在时间和空间异质性问题，单次、单病灶的免疫组织化学检测本身可能存在一定的技术缺陷
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【时云飞教授：CD30定量判读推动外周T细胞淋巴瘤治疗格局改变】中提及的这一病例，在会诊切片中，可以看到视野中确实是肿瘤性病变，淋巴结大部分区域的CD30为阴性；但是，仔细寻找发现，
有一块小灶（下图红框所示）为CD30的热点区域，在该区域CD30的阳性表达约为20%
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。证明同一组织可能存在空间异质性。
【薛学敏教授：CD30在淋巴瘤病例治疗过程中的变化】中提到的这一病例CD30的表达则从最初的10%淋巴细胞阳性逐渐增强，第二次治疗时达到55%淋巴细胞阳性，最终肿瘤细胞中几乎全部阳性（整体淋巴细胞阳性率为20%）。这一病例从DLBCL逐渐演变为cHL，治疗过程中CD20丢失和CD30表达增强，提示我们
对于难治性或不缩小的肿瘤病例，再次活检是必要的
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。也提示我们CD30的表达在病变的不同阶段存在时间异质性。
固定是从获取样品到成片染色之间的步骤中最有影响力的因素, 因此样本固定产生的错误是永久性的
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使用正确的固定液及时固定非常重要。
1、固定延迟
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：固定延迟导致蛋白质降解增加。根据抗原的不同，可能导致不可逆的弱染色或无染色。
2、固定不足或组织脱水不彻底
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：固定不足常导致组织中心区域染色减少，外周区域染色更强烈。在处理、固定良好的标本中，细胞不应收缩，细胞质保存完好，单个细胞之间不应存在人为的空隙；如果固定不完全，细胞核可能变得浑浊或模糊，组织形态也不能很好地保持。
3、固定时间过长
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：福尔马林固定时间过长可能导致染色微弱或缺失。后续延长抗原修复时间、提高抗体浓度、延长试剂孵育时间、使用信号放大/强化等检测系统等可能会有帮助，但往往会增加背景染色，所以最好避免福尔马林固定超过48小时。
4、固定液的种类
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① 酒精：可能会导致大多数分化簇（CD）标记物和生长因子肽类的抗原丧失其抗原性。② 含汞的固定剂（B5、Zenkers固定剂）：会导致CD4, CD5, CD10, CD23，CD30失去免疫反应性。
5、脱钙
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：骨骼和骨髓样品的强酸脱钙对大多数抗原的检测有负面影响，特别是分化簇（CD）标记物
6、免疫组化切片制备：
① 切片厚度：切片太厚，会导致细胞重叠，无法判读；切片太薄，又会导致部分抗原的丢失
② 切片保存：切片未及时进行染色而保存时间太长，抗原会随着时间的延长减弱
③ 捞片位置：部分自动化免疫组化染色机对于捞片位置有要求，捞片位置不恰当，可能导致“阴阳脸”或假阴性
④ 切片质量：切片有皱褶、气泡等，或未使用防脱玻片引起脱片掉片等均会影响结果判读
1、不恰当的抗原修复方式可能导致假阴性的结果
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2、不恰当的抗原修复时间可能导致非特异性的染色
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3、环境温度变化导致不同实验室的染色结果存在差异
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5、检测系统灵敏度低导致染色过弱或完全假阴性
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6、不成功的染色方案导致染色过弱或完全假阴性
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单克隆CON6D/5抗体需要在改良的低pH缓冲液中使用HIER以获得最佳性能。
不充分的CD30染色可能是由于pH不适宜、检测系统灵敏度低以及一抗浓度过低的综合原因。
免疫组织化学的质量控制贯穿于免疫组织化学实验的全流程，其包括室内质控和室间质控
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NordiQC在免疫组化质控方面已有丰富的经验，该机构定期对相关的病理实验室进行CD30-IHC的染色评估，2022年对365家实验室的CD30染色评估显示，75%的实验室获得了充分染色(最佳或良好) ，与之前2017年的评估结果（83%）相比通过率略有下降，但染色不足的普遍问题依然是细胞染色反应太弱或完全假阴性；染色反应不足的常见原因包括抗原修复不足（加热时间过短或温度过低）、一抗浓度过低或孵育时间过短、检测系统灵敏度低或其他技术问题
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