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赵庆顺
教授
南京大学 模式动物研究所 遗传学与发育生物学教授 博导
学士(1983-1987,南京大学)、硕士(1987-1990,南京大学)、博士(1996-2001,普渡大学)
2001-2003年在杜克大学医学中心进行博士后训练
2003年全职加入南京大学模式动物研究,2006年晋升为教授
CR
ISPR/
Cas
9基因
组
编
辑
技
术
第一天上午
9:00-12:00 下午13:00-17:00
第一讲、
CRISPR
/
Cas9
基因组编辑技术的工作原理
1
、基因组靶向修饰技术发展简史(从基因打靶到基因编辑)
2
、
CRISPR
/
Cas9
基因组编辑技术的工作原理
第二讲、
CRISPR
的设计
1
、
CRISPR
设计
的依据及
原则
2
、常用
CRISPR
设计软件简介(
CRISPR
的在线设计
简介)
3
、靶向编辑基因的基因型确认及
CRISPR
的再设计
休息与答疑
第三讲、
CRISPR/Cas9基因组编辑工具的制备及向细胞内的递送策略
1、
DNA
形式的基因组编辑工具的制备与递送
2
、
RNP
形式的基因编辑工具的制备与递送
第四讲、
sgRNA活性验证
1
、
插入缺失(
Indel
)突变检测的基本策略
2
、
基于胚胎反应器的活性验证方法
3
、
基于细胞系的活性验证方法
休息与答疑
第
五
讲
、利用
CRISPR技术创
制哺乳动物
基因组编辑细胞系
1、
基因敲入
(如点突变和报告基因等)
的供体设计原则及实例
分析
2
、
基因组编辑工具导
入细胞系的方法
(转染与转导)
3
、基因组编辑细胞系的
筛选及基因型的快速确认
4
、基因
编辑子
的
功能
确认
策略
第二天上午
9:00-12:00 下午13:00-17:00
第六讲
、利用
CRISPR技术创建基因敲除或敲入动物
突变体
(斑马鱼基因组编辑突变体的制作)
1
、
RNP
基因组编辑工具
(和供体)
递送至
受精卵
2
、
初建者(
F0
)
体细胞携带靶向突变等位基因的
鉴定
3
、
基因组编辑突变体
的
筛选及建系
(
F1
)
4
、基因
编辑子
的
功能
确认
策略
第七讲
利用
CRISPR
技术创建基因敲除或敲入植物、真菌 和 细菌突变体
1
、基本过程
2
、基因组编辑工具的制作
3
、基因组编辑工具的递送
4
、基因组编辑突变体(
F1
)的筛选及建系
5
、基因敲除
/
敲入的功能确认
休息与答疑
第八讲、
CRSIPR/Cas9基因组编辑技术的脱靶问题
1、
脱靶的产生原因
2
、脱靶检测
3
、解决脱靶问题的方法
4
、脱靶问题对不同领域研究者的意义
第九讲、利用
CRISPRi或CRISPRa技术调控基因在细胞或胚胎中的表达
1
、
dCas9
的特征简介
2
、运用
CRISPR
技术调控基因在细胞
或胚胎
中表达的基本实验过程
3
、
CRISPR
技术的转录抑制
4
、
CRISPR
技术的转录活化
5
、碱基编辑技术
6
、核酸检测
休息与答疑
第十讲、斑马鱼模型在评价突变基因与疾病发生关系中的应用
1
、科学问题的提出
2
、与疾病共分离的遗传突变的常见类型
3
、评价人突变基因的斑马鱼模型的建立(
CRISPR
i
法基因敲降法、
CRISPR
法基因敲除、或过表达)
4
、斑马鱼模型表型模拟人类疾病临床特征(显微形态学、组织学、转录组学)
5
、利用斑马鱼模型解析疾病发生机制研究的一般策略
第十一讲
“基因编辑婴儿”事件及CRISPR技术的伦理学问题
1
、 “基因编辑婴儿”事件
2
、新型基因组编辑技术的发展
3
、基因组编辑技术的
应用
4
、基因组编辑技术应用的伦理学问题
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