教你在药物分析研究中如何让自己成为色谱专家（一）

导读：在药物研发中，药物分析是一项繁杂而细致的工作，并且要具有足够的耐心与细心。对于分析工作的性质，大家看法各不相同，在此不一一赘述。但这不影响药物分析在药物研发中的关键作用，要做好分析工作，必须要有深厚的基本功，当然，大量的分析实验经验也是不可缺少的。今天就分析工作中常用的色谱柱，整理整理（每日五问五答），与大家分享！

1、色谱柱是否可以反冲，那什么柱子可以反冲，什么不可以?反冲后是正着用，还是反着用?

一般的正相、反相柱应该都能反冲，只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲。可不可以反冲得看你的柱子两头的孔径是否一致，若不一致肯定不行。 一般来说，低流速反冲是没有任何问题的。因为柱子在制备的时候，是在40MPa左右条件下进行填充的，1.0ml/min的流速的柱压顶多十几MPa，怎么可能对柱床造成明显的影响呢？ 有人说：“反冲可能使键合相碳链一边倒，与原来的方向相反，会影响柱子的分离效果。”  众所周知，只有碳链在完全自由舒展的条件下，柱效是最好的，照上面的说法，反冲不刚好把碳链恢复到自由舒展的状态，这样不更好吗？ 其实，实验早已证明：在至少5%的有机相中，碳链是可以完全自由舒展的。正冲则可能污染整个柱子。反冲是为了把柱头的污染物冲洗掉，反冲后还是正着用比较好，以免柱子的两头都被污染。

2、对于一根常用的c18 柱，拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?

新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单，多进几次样品，直到峰面积和保留时间稳定，再进行正式进样
测定。如果要加快平衡时间，把前面用来平衡的进样样品浓度加大，或者不等洗脱完成，连续进样多针。用待测物对新柱平衡，目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。

3、如果柱子取下来放置一段时间，需要做什么保护吗?