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H5N1感染奶牛和工人引起全球关注,实验室检测应如何开展?

ivd行业的硬菜  · 公众号  ·  · 2024-05-29 16:16

正文

2024年3月25日,美国USDA首次确认奶牛中存在高致病性禽流感(HPAI)病毒。从一开始在堪萨斯州和德克萨斯州奶牛场中的牛、牛奶、死亡的猫中检测到H5N1病毒,到德克萨斯州一个奶牛场的奶农确诊感染高致病性禽流感病毒H5N1,截止至2024.4.30美国已经在9个州的牧场中检测到H5N1病毒。


一、FAO/WHO/WOAH对于H5N1病毒的初步风险评估:



牛传人流感A型(H5N1)病毒的可能性有多大?

迄今为止,在美国报告了一例在乳牛场工作的人员感染流感A型(H5N1)病毒的病例,该乳牛场的牛被推测感染了A(H5N1)病毒。这名病例唯一的症状是 结膜炎,并已经康复。 据报道,感染的泌乳牛只在其乳汁中病毒载量很高,因此 可能对与它们密切接触的人构成暴露风险。 目前正在调查通过消费和处理牛奶及奶制品在传播中的潜在作用,以及巴氏杀菌在减轻潜在风险中的作用。只要人们在没有适当的个人防护装备的情况下与感染的牛只接触,就存在人类感染的风险。通过采取措施减少接触病毒,如使用推荐的个人防护装备、适当的个人卫生习惯以及其他基于风险的生物安全措施,可以降低这一风险。


当前H5N1对人类构成的风险有多大?

WHO评估A(H5N1)病毒对公共健康构成的 整体风险为低 ,对于接触感染鸟类或动物或受污染环境的人群, 感染风险被认为是低到中等。 这一风险需要密切监测,WHO和合作伙伴将继续定期评估并发布有关禽流感的公共卫生风险评估。


人类之间传播禽流感A(H5N1)病毒的可能性有多大?

目前认为,当前病毒保留了禽流感病毒的基因组和生物学特性,并且仍然很好地适应于在鸟类中传播,除非病毒发生进一步的基因变化,否则当前流行的A(H5N1) 病毒在人与人之间传播的可能性不大。 WHO将与联合国粮食及农业组织(FAO)和世界动物卫生组织(WOAH)一起,继续监测这些病毒,并将根据更多信息的出现重新评估与当前传播的A(H5N1)病毒相关的风险。


二、美国USDA APHIS对H5N1流感病毒的病例定义


1.疾病信息一般疾病和病原体信息:

截至2024年3月下旬,与奶牛轻度疾病相关的牛奶和其他牛源样本中检测到 H5N1 2.3.4.4b亚型,基因型为B3.13 (根据GenoFlu)。该病毒已通过裂解位点分析和生物测定测试(根据WOAH的IVPI)被鉴定为高致病性,目前B3.13基因型与影响野生鸟类和家禽的其他基因型没有显著差异。疾病的传播途径仍在调查中, 已有证据显示发生了水平传播。 在乳牛中的估计群体水平潜伏期似乎有变化,从大约12到21天不等。潜伏期可能是多因素的,应考虑暴露途径、病毒剂量、动物的生产阶段,以及目前尚不清楚的其他因素。在泌乳牛只的乳汁分泌物中发现了高浓度的病毒。

1.1 临床症状:

感染牛只可能无症状(亚临床)或有症状(临床),无论症状如何, 病毒主要在牛奶和乳腺组织中发现。 临床症状可能包括 食欲下降,同时伴随反刍和瘤胃蠕动减少;包括清澈鼻分泌物在内的呼吸道症状;以及随后的牛奶产量急剧下降。 其他临床症状可能包括异常粘性或松散的粪便、倦怠、脱水和发热。严重受影响的牛只可能乳汁变稠、浓缩,呈初乳状,或完全不产奶。


2.实验室标准

牛奶和乳腺组织是泌乳动物的首选样本; 非泌乳动物应使用深部鼻拭子。所有非阴性样本必须转至NVSL进行确认性测试。血清和牛奶的血清学效用正在调查中。

2.1 病原体分离和鉴定: 通过以下方式检测流感A型病毒的存在:

2.1.1 优先对活体或死亡动物的样本使用 real-time PCR检测流感A型,以及针对H5 2.3.4.4b的检测(亚型检测应与流感A型检测同时使用)。也可以进行病毒分离。

2.2 病原体特性: 使用基因组测序方法确定血凝素裂解位点的氨基酸序列,根据WOAH陆生动物手册对病毒进行分型。NVSL有针对H5 2.3.4.4b的谱系特异性分型PCR检测。




3.家畜病例定义和报告标准


3.1 疑似病例:

3.1.1 与H5 2.3.4.4b感染相符的疾病;或

3.1.2 使用商业化的流感A型抗原检测试剂盒在牛奶中检测到流感A型抗原,并伴有相符的疾病。

3.2 推定阳性病例:

3.2.1 如上定义的疑似阳性病例,通过rRT-PCR检测到流感A型H5 RNA,无论是否存在相符的疾病;或

3.3 确认阳性病例:

3.3.1 通过分子检测由NVSL确认HPAI H5N1 2.3.4.4b;将进行全基因组测序以确定基因型。


三、美国USDA APHIS对对家畜A型流感病毒实验室检测指南

美国USDA为了继续监测和了解这种病毒的范围并减少高致病性禽流感(HPAI)H5N1病毒的进一步传播风险,从而减少对家禽和家畜的更大威胁,动植物卫生检验局(APHIS)在2024年4月24日发布了一项联邦命令, 要求对跨州运输的泌乳期奶牛进行出发前测试,并要求所有实验室和州动物卫生官员报告所有阳性流感A型核酸检测诊断结果。

1.在批准的NAHLN实验室对泌乳期奶牛进行必要的跨州移动检测:

1.1泌乳期奶牛在移动前必须进行测试 (样本必须提交至NAHLN实验室):从 单独的奶牛收集牛奶/乳房分泌物。 确保每个乳区都被采样,因为有报告称只有其中一个乳区含有病毒。 将每个乳区的牛奶合并成一个样本提交给实验室。每只动物提交3-10毫升的牛奶。

1.2 NAHLN实验室可以 将最多5头牛的牛奶样本混合在一起; 这必须在实验室内完成。

1.3 NAHLN实验室将进行NAHLN批准的PCR测试:A型流感M基因、H5基因以及可选的2.3.4.4b。

2.自愿对牛只进行检测







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