细胞内的氧化反应，其实对于免疫细胞来讲也是比较重要的一个诱导激活因素。但这方面的研究其实并不算是太多。于是夏老师就找了怎么一篇西安交通大学发表在11.4分的Redox Biol上的文章，这篇文章研究的就是氧化反应与炎性T细胞活化之间的关联性：
这篇文章研究的是NCF4这个基因，这个基因其实是形成NOX2复合物的一个蛋白。NOX2在很多信号通路中都扮演很重要的角色（比如NOD样受体信号通路、HIF1信号通路、MAPK信号通路、铁死亡等等，在这些信号通路里NOX2都是负责ROS生成的，不清楚这些信号通路的话，可以去看看《信号通路是什么鬼？》系列），NCF4在这个复合体上又叫p40phox，NCF1叫做p47phox：
他们之前的研究表明NCF4的R58A突变体会造成其功能受阻，导致细胞内ROS下降，促进机体的CIA（胶原诱导的关节炎）易感：
他们之前研究的模型是使用GPI（葡萄糖-6-磷酸异构酶）的325-339多肽去诱导小鼠关节炎，这种GPI诱导的关节炎在这里被称为GIA。他们之前的研究发现，具有NCF1的m1J突变，可以改变T细胞对含半胱氨酸肽的反应并增强关节炎，也就是说缺乏ROS（NCF1突变了）可能通过抗原加工和呈递细胞（如巨噬细胞，因为影响了T细胞对抗原的敏感性）影响T细胞的活化。于是他们首先分析了NCF4的R58A突变对于GPI多肽诱导GIA的影响，结果发现 NCF4的R58A突变加速GIA：
接着他们发现，NCF4的R58A突变可以活化iLN（引流腹股沟淋巴结）和滑膜中T细胞的活性，这T细胞的活化，也就是NCF4的R58A突变造成GIA加速的关键因素：
他们发现在GPI免疫后的第七天，引流去除iLN（这里就是柯霍氏法则的验证，以证明滑膜中致炎症的T细胞的来源，是否和预料中的一样是从iLN中迁移来的，不清楚柯霍氏法则的话，可以看看《轻松的文学导读》和《列文虎克读文献》），可以防止野生型和NCF4的R58A突变小鼠的关节炎的发展，但第八天就不行。这说明在第八天，致关节炎的T细胞已经迁移到了关节部位：
NCF4的R58A突变小鼠的T细胞在 GPI多肽诱导作用下，增殖和活化速度明显加快。LAT（T细胞活化连接蛋白）和SRC（原癌基因酪氨酸激酶，这个在很很多信号通路中都有比较重要的作用了，比如在线粒体自噬、Anoikis失巢凋亡和VEGF信号通路等等，这个在《信号通路是什么鬼？》系列里也都有，可以去看看）的接头在NCF4的R58A突变小鼠的T细胞中被磷酸化程度更高：
那么NCF4既然是NOX2复合物的组成部分，那么NOX2是否也在这里起到了什么作用呢？他们进一步进行NOX2的分析发现，NOX2并没有在NCF4的R58A突变小鼠的T细胞中表达，其复合物的成分主要是在巨噬细胞中表达的：
NCF4的R58A突变小鼠的巨噬细胞中，ROS的量也明显下降，这就导致了其更强的促炎细胞因子反应。说到促炎症反应，第一个想到的就俩信号通路——JAK-STAT信号通路和NFκB信号通路（这俩信号通路在炎症的研究中算是比较经典的了，不清楚的话，可以去看看《信号通路是什么鬼？》系列，有讲过）。通过二代测序，他们发现的确这俩信号通路有激活，而炎症细胞因子的增加也由STAT1和P65的磷酸化增加决定：
既然NCF4的R58A突变小鼠的巨噬细胞由于ROS增加得到了活化，那么是否是巨噬细胞通过对于GPI多肽的吞噬，然后将抗原递呈到T细胞，导致的T细胞活化呢？他们发现NCF4的R58A突变，的确会影响半胱氨酸-半胱氨酸GPI肽通过巨噬细胞的抗原递呈：
而单核吞噬细胞的缺失（这里他们使用了抗原递呈细胞的抑制剂，其实也是柯霍氏法则的验证，这个可以看看《轻松的文献导读》和《列文虎克读文献》）或者捕获iLN中的T细胞，都可以缓解GPI多肽诱导的关节炎症发展：
最后他们使用了免疫抑制剂FTY720，它可以诱导淋巴细胞凋亡，加速外周循环的成熟淋巴细胞归巢。通过FTY720处理捕获LN中的活化T细胞可改善GPI多肽诱导的关节炎：
这篇文章其实挺有意思，这篇文章有两个着眼点，一个是NCF4的R58A突变导致的ROS降低，另一方面是GPI多肽诱导的关节炎。这两者都聚焦在了T细胞的活化，而造成T细胞活化的原因，则是由于NCF4的R58A突变后的ROS降低，激活了巨噬细胞，通过巨噬细胞的吞噬及抗原递呈，激活了T细胞，引发了炎症。好了，今天就先策到这里吧，有兴趣的话可以看看这篇文章，祝你们心明眼亮。
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