专栏名称: 小张聊科研
聊聊跟科研有关的感想心得,如基金,文章和实验。
目录
相关文章推荐
弗雷赛斯  ·  最高影响因子51.27,价格却只有市场价1/ ... ·  3 天前  
NaturePortfolio  ·  中大&深圳先进院:结直肠癌早期干预新思路 ... ·  1 周前  
51好读  ›  专栏  ›  小张聊科研

如何一本正经地玩坏ceRNA机制

小张聊科研  · 公众号  · 科研  · 2017-05-14 21:40

正文

是这样的,我们小张团队最近打算研发了一款可以防止可爱体贴的女朋友变成母老虎的护肤霜,名字都想好了,叫做“橘猫牌温柔霜”,不日将正式上市,请大家关注。

这款护肤产品的基础是ceRNA机制,其主要成分除了护肤霜之外,还有特异性的siRNA siR-Tiger,其可以降解lncRNA lnc-Tiger,而lnc-Tiger促进了母老虎虐待症的症状,临床试验表明:这款护肤霜果然在表型上抑制了母老虎症的表型,使女朋友喵属性回归,可爱温柔,上得厅堂,下得厨房,再也没出现过吵架、掐胳膊、踢腿、揪耳朵的表现型(Phenotype)。

 

我们的志愿者,机智的怪阿姨,参与了真人临床测试,我们大家都表示:效果很明显,实验室的气氛和谐了很多。

那么咱们就来一起回顾一下,这款产品诞生的整个过程,充满了发散的逻辑思维方式、创新的科学问题探索以及严谨的分子机制研究。

(一)综述:母老虎虐待症现状

母老虎虐待症(Wife Tigerosis,WT)一直以来是困扰全世界老公的女性疾病之一,由于发病率和老公受伤率较高,母老虎虐待症极大威胁着老公们的健康,WHO甚至把母老虎虐待症列为仅次于心血管病的第二大疾病。调查显示,中国按地区不同,20~40岁女性的发生率平均为30%,发病率极高。2005年美国因为母老虎虐待症导致的精神损失、身体伤害的医疗费用至少造成169亿美金的损失,预计到2025年这一损失将会达到253亿美金,另据数据披露,2009年中国约4000万女性患有母老虎虐待症,25~35岁以上女性在其中所占的比例将近80%,预计到2050年,中国患有母老虎虐待症的女性将达到2.12亿

2016年著名杂志《Girl》上的一篇综述,对WT按程度进行分型:

  1. 轻度WT:翻白眼、不做家务、翻看微信聊天记录、禁止夸其他女性等;

  2. 中度WT:无条件陪逛街、上交全部工资、禁止熬夜看球、威胁分手等;

  3. 重度WT:踢腿、揪耳朵、掐胳膊、跪键盘等身体伤害;

 


(二)miR-cat 调控基因TIGER,参与母老虎虐待症的发病过程     

小张团队从事母老虎虐待症(WT)研究多年,有比较丰富的科研经历,已有多篇SCI发表,总的影响因子累计已达70.6分。

小张团队的研究成果包括

  1. 首次发现母老虎蛋白(Tiger),全长438个氨基酸,由第24号染色体上基因TIGER转录并翻译表达,证明其表达直接参与了母老虎虐待症的发病过程,研究成果发表在了《Women in Marriage》(IF=30.5)

  2. 在后续的研究中小张团队再次发现了一个命名为miR-cat的miRNA,生信分析发现其与Tiger mRNA有多个结合位点,后续的Q-PCR、WB、敲减实验、荧光素酶报告系统,均证明miR-cat结合Tiger mRNA,降解该mRNA,下调母老虎蛋白的表达,母老虎虐待症状也得到改善,研究成果发表在了《Girl》(IF=40.1)

 


(三)lnc-Tiger竞争结合miR-cat,调控基因Tiger的表达

那么miR-cat的表达是不是也有调控机制呢?是否和lncRNA有关系呢?还真被X湿兄发现了,科研思路和实验过程如下:


  1. lncRNA芯片分析:分别取老婆温柔乖巧时期、母老虎症发病时期的血细胞,做芯片差异分析,发现了5条lncRNA表达量上升了10倍,而有条lncRNA,lnc-Tiger表达量上升了33倍。

  2. 生信分析:经过结合序列的分析,lnc-Tiger和miR-cat有多达5个结合位点。

  3. 细胞功能试验:分别对lnc-Tiger进行过表达和敲减实验,发现其表达量与miR-cat的表达量呈现负相关,而和Tiger蛋白的表达量呈正相关。

  4. 细胞表型验证:lnc-Tiger过表达的细胞株,行动力更强,经常无缘无故暴走,如下图


  5. lncRNA的胞内定位:X湿兄设计了针对lnc-Tiger的荧光探针,FISH技术发现lnc-Tiger位于胞质内,作者怀疑是ceRNA机制

  6. lnc-Tiger和miR-cat结合实验:荧光素酶报告系统,验证了确实是ceRNA机制

  7. 母老虎虐待症雌性大鼠模型建造:lnc-Tiger过表达后,雌性大鼠明显懒了很多,占着食槽不让雄大鼠吃,还让雄大鼠整天整理垫料,保持整洁,另外还发现了雄性大鼠身上有多处掉毛和抓痕,精神状态也变得很差,睡眠不足;而lnc-Tiger被siRNA-Tiger沉默的雌性大鼠,其笼内的雄性大鼠生活状态异常良好。

 

(四)本课题ceRNA机制的研究路线图

(五)“橘猫牌温柔霜”的研制成功

在上述实验中,我们发现了siR-Tiger敲减了大鼠的lnc-Tiger,有效地降低了雌大鼠的狂躁症状以及好动表型,使得雌大鼠对待雄大鼠的态度也好了很多,于是我们把这种siRNA添加入了怪阿姨的BB爽,使用3个月之后的观察,怪阿姨的脾气得到极大地改观,对我们也温柔了很多,开始主动打扫卫生了。

于是我们打算和白猫集团进行合作,研制一款用于有效改善女性母老虎虐待症的化妆品,“橘猫牌温柔霜”,只要连续使用3个月,保证能让狂躁的女朋友或者母老虎症的老婆,变得像一只温柔可爱的猫,让被欺负的老公们重新走上人生巅峰!

 


祝妈妈们,节日快乐!永远美丽!


长按二维码识别关注“小张聊科研”

关注后获取《科研修炼手册》1.0、2.0、3.0、4.0、基金篇精华合集