主要观点总结
本文主要介绍了百日咳的相关情况。今年我国百日咳报告病例数显著上升，达到历史高位。文章以一个特殊的百日咳病例为例，介绍了百日咳的临床表现、诊断和治疗。实验室诊断是确诊百日咳的关键手段，其中细菌培养法是重要的诊断方法之一。文章还介绍了百日咳鲍特氏菌在培养基中的生长特点和鉴别方法，以及启新（苏州）生物科技有限公司新推出的百日咳细菌培养法系列产品的特点。
关键观点总结
关键观点1: 百日咳病例数显著上升
今年我国百日咳报告病例数接近25万，是去年同期的53倍多，死亡病例高达到22例。
关键观点2: 百日咳的临床表现
百日咳临床表现为咳嗽、呼吸急促，可持续较长时间，婴儿和新生儿的临床表现可能不典型，容易发展成危急重症，甚至引起死亡。
关键观点3: 实验室诊断是确诊百日咳的关键手段
实验室诊断如细菌培养法和PCR检测对于及时发现和治疗百日咳具有重要意义。
关键观点4: 百日咳鲍特氏菌在培养基中的生长特点和鉴别方法
病原菌于B-G agar和RL型培养基上的生长特点不同，观察菌落时需使用立体显微镜或放大镜。
关键观点5: 启新（苏州）生物科技有限公司的百日咳细菌培养法系列产品
该系列产品具备使用方便、阳性率高的特点，符合指南要求，有助于高效地开展检测和科研工作。
正文
今年，我国百日咳报告病例数显著上升。据国家疾病预防控制局检测数据显示，2024 年 1～5 月全国累计报告百日咳病例数已接近 25 万，是去年同期的 53 倍多，死亡病例高达到 22 例
[1]
。
虽然到 20 世纪 90 年代初，百日咳年报告病例数下降至最低的 20 万例左右，之后全球百日咳发病率一度维持在很低水平。但从 20 世纪 90 年代末开始，一些国家陆续出现百日咳发病率的再次上升，甚至暴发流行的现象，被称为「百日咳再现」
[2]
。报告百日咳「死灰复燃」的原因可能包括百日咳鲍特杆菌其抗原成分的发生变化，现阶段对于该疾病认识和诊断能力的提高，以及疫苗效力降低和免疫力下降
[3]
。
那么它是何方妖孽？为何来势汹汹？接下来我们先看一个特殊的病例
[4]
：
患儿，女，出生 42 天（4.8 kg），因「咳嗽、呼吸急促 4 天」就诊于儿童医院。患儿经阴道正常分娩，足月出生。
查体：呼吸 64 次/分，血氧饱和度为 88%，经 3 L/min 面罩氧气后，血氧饱和度提高到 97%。心率 156 次/分，体温为 37.8 °C，精神状态欠佳。肺部听诊发现双侧有哮鸣音和湿啰音。其余的体格检查结果正常。
入院时患儿诊断为重症肺炎，予以静脉滴注头孢哌酮-舒巴坦和面罩吸氧。
该患儿怀疑此次病因为百日咳，原因是婴儿持续性发绀性地咳嗽，婴儿母亲也存在持续咳嗽，以及患儿年龄太小无法接种疫苗。
经聚合酶链反应（PCR）和婴儿鼻咽分泌物培养均确诊百日咳阳性。
入院时的胸片显示右肺叶塌陷和左肺叶实变。入院当日血常规：Hb 8.3 g/dL，WBC 77.19 × 10
9
/L，NEUT# 35.63 × 10
9
/L，PLT 793 × 10
9
/L，LYMPH# 无法测定。两天后，WBC 增加到101.85 × 10
9
/L，LYMPH# 36.76 × 10
9
/L，Hb 水平下降到 6.9 g/dL，血液涂片显示 WBC 增多、贫血和 PLT 增多。
住院后 3 小时出现呼吸窘迫加重，因此转到儿科重症监护病房（PICU）进行进一步治疗。在 PICU 进行了呼吸机辅助通气治疗、输血，同时静脉注射红霉素和万古霉素。
由于患儿在治疗期间病情仍在不断恶化，患儿父母在其住院第 16 天选择停止治疗，患儿在拔管后不久死亡（重要时间节点如图 1 所示）。
图 1：重要临床事件时间表。ADV = 腺病毒，APTT = 活化部分凝血活酶时间，BM = 骨髓，Bp = 百日咳鲍特氏菌，CMB = 巨细胞病毒，CPAP = 持续气道正压，CT = 沙眼衣原体，CVVHDF = 连续静脉-静脉血液扩张滤过，EBV = EB 病毒，ET = 换血疗法，FIB = 纤维蛋白原，Flu = 流感，Hb = 血红蛋白，HBV = 乙型肝炎病毒，MP = 肺炎支原体，PCR = 聚合酶链反应，PICU = 儿童重症监护病房，PT = 凝血酶原时间，RBC = 红细胞，RSV = 呼吸道合胞病毒，WBC = 白细胞。
该病例提醒我们，小婴儿和新生儿由于缺乏典型的临床表现，且容易发展成危急重症，甚至引起死亡
[2]
。并且百日咳发病初期症状与普通感冒极为相似，典型病例较少，临床极易漏诊和误诊，导致病情加重，威胁患儿身心健康。因此，采取及时有效的诊断对百日咳后期干预治疗和预防具有重要指导意义。
实验室诊断是确诊百日咳的关键手段，对于疾病的及时发现和治疗具有重要意义。WHO、美国 CDC 和欧洲 CDC 均将从咳嗽患者临床标本中分离出百日咳鲍特菌或 PCR 检测出百日咳鲍特菌作为百日咳的实验室确诊依据，最新版《中国百日咳诊疗与预防指南（2024 版）》中也建议，有条件的医院尽可能常规开展百日咳鲍特菌的 PCR 检测和（或）细菌培养
[5]
，加强百日咳病例的早期诊断和治疗。其中细菌培养法是百日咳实验室诊断的传统方法，其优点是操作简便、成本较低，能够直接分离出病原体，且特异度、阳性预测值高，可以获得药敏结果，可指导抗菌药物合理选用
[5]
。
百日咳鲍特氏菌采集呼吸道标本检测百日咳鲍特菌，优先推荐采集鼻咽拭子，对于鼻咽拭子，推荐使用涤纶、人造丝或者植绒拭子。若用于细菌培养，如果不能立即接种平板，则将鼻咽拭子置于 Regan-Lowe 运送培养基中
[5]
。
百日咳鲍特氏菌在一般培养基不会生长，须使用 B-G agar 或 RL 型培养基。病原菌于 B-G agar 上之生长极慢（2～4 天），为小型、凸出菌落，类似水银滴，且具有极强的折旋旋光性。其菌落周围有模糊的 β-溶血圈环。病原菌于 RL 型培养基生长较为快速，48 小时即可观察到，RL 型培养基更有实用优势，其长出的菌落为小型半球形，乳白色发光（图 2）。
图 2：将鼻咽拭子检体接种于 RL 型培养基（左）与 B-G 培养基（右）
至于副百日咳鲍特氏菌则生长较快，β 溶血型较清楚，呈灰色或些微棕色。观察菌落时可用立体显微镜或用 10x 放大镜观察。
启新（苏州）生物科技有限公司新推出的百日咳细菌培养法系列产品（运送培养基、RL 型培养基），具备使用方便、阳性率高的特点，符合指南要求，是检测百日咳鲍特氏菌培养法的「检验利器」。
助力高效地开展检测和科研工作。
内容审核：沈佳钰
项目审核：李琳
题图来源：图虫创意
[1] 国家疾病预防控制局官网 https://www.ndcpa.gov.cn/jbkzzx/c100011/common/list.html
[2] 华春珍,王传清,杨章女,等.百日咳病原新认识及其抗感染策略[J].临床儿科杂志,2024,42(06):480-484+508.
[3] Nieves DJ, Heininger U. 2016. Bordetella pertussis. Microbiol Spectrum 4(3):EI10-0008-2015. doi:10.1128/microbiolspec.EI10-0008-2015.
[4] Tian SF, Wang HM, Deng JK. Fatal malignant pertussis with hyperleukocytosis in a Chinese infant: A case report and literature review. Medicine (Baltimore). 2018 Apr;97(17):e0549. doi: 10.1097/MD.0000000000010549. PMID: 29703037; PMCID: PMC5944509.
[5] 中华医学会感染病学分会儿科感染学组, 国家卫生健康委能力建设和继续教育儿科专委会感染组, 中国临床实践指南联盟方法学专委会,等。中国百日咳诊疗与预防指南（2024版） [J] . 中华医学杂志, 2024, 104(15) : 1258-1279. DOI: 10.3760/cma.j.cn112137-20240124- 00179.
