基因转染是深入了解特定基因功能及其作用机制的关键操作。然而在做基因转染时,无论是体外还是体内实验,都有诸多难题让人叫苦不迭:
01.
mRNA 稳定性差:
mRNA 的单链结构导致其稳定性相对较低。核酸酶污染、保存条件不当,都会加速 mRNA 的降解。
02.
目标基因表达不足:
mRNA 的 5’UTR、3’UTR 区域设计不合理,或者密码子优化不佳,都可能导致目标蛋白表达量达不到预期;载体包装容量不足,导致基因表达受限。
03.
体内递送难:
动物体内存在多种生理屏障限制了基因载体进入靶组织或靶细胞;基因载体进入动物体内后难以均匀分布到目标组织。
04.
免疫反应干扰:
进入细胞或机体内的 mRNA、基因载体等易被识别为外来病原体,从而激活免疫反应,影响基因转染效果。
面对这些棘手的基因转染难题,大家往往耗费大量时间和精力却收效甚微。好消息来了,
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