于国华教授：胃/胃食管结合部腺癌中Claudin18.2免疫组化评估之理论篇

肿瘤资讯 · 公众号 · 医学 · 2025-02-18 20:00

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整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均高居不下，给无数患者家庭带来了沉重打击。随着肿瘤学、分子生物学研究的不断深入，晚期胃癌的治疗已从传统的“一刀切”化疗转变为针对患者分子特征的个性化治疗。SPOTLIGHT研究和GLOW研究一致地证实了Claudin18.2作为胃癌新兴靶向治疗靶标的潜力，其规范化检测也成为临床上备受关注的话题。

近日，病理学权威期刊 Modern Pathology 杂志发表一篇名为Claudin18.2 Immunohistochemical Evaluation in Gastric and Gastroesophageal Junction Adenocarcinomas to Direct Targeted Therapy: A Practical Approach的文章 [1] ，系统地介绍了Claudin18.2的表达、检测现状及相关实践经验。本期【肿瘤资讯】有幸邀请到青岛大学附属烟台毓璜顶医院于国华教授详细解读这篇文章基础部分的内容，特整理成文，以飨读者。

本期特邀嘉宾——于国华教授

于国华教授

青岛大学附属烟台毓璜顶医院

病理科主任，主任医师，教授，医学博士

硕士研究生导师，司法鉴定人

以色列Rambam Health Center访问学者、美国UNMC博士后
烟台市“双百计划”突出贡献中青年专家
烟台市卫生系统优秀共产党员
山东省医师协会病理科医师分会常务委员
山东省医学会病理学分会淋巴瘤学组副组长
中国医疗器械行业协会（CCPI）病理专业委员会委员
中国研究型医院学会病理学分会青年委员
亚专科方向：血液病理、分子病理

以第一作者或通讯作者发表中华级和SCI收录论文32篇，单篇最⾼影响因⼦29.5

以⾸位获⼭东省中医药科学技术奖、⼭东省医学科技创新成果奖各⼀项

立足当下，晚期或转移性胃/胃食管结合部腺癌的生物标志物检测现状

由于对胃/胃食管结合部腺癌分子特征的了解不断深入，靶向治疗在胃癌中的应用也日益广泛 [2] 。临床上，绝大多数胃癌患者在初诊时已处于局部晚期或转移期，单纯的根治性手术不再是患者的理想选择 [3] ，基于组织的生物标志物检测成为个体化系统治疗的必要前提 [4,5] 。

HER2是胃癌中首个被纳入常规病理检测的生物标志物 [6] ，距今已有十多年的时间。近年来，随着免疫检查点抑制剂在一线治疗地位的确立，PD-L1表达水平也成为晚期胃癌诊断评估的核心 [7-9] 。此外，国内外指南中也建议，在治疗前需对DNA错配修复蛋白（MMR）或微卫星不稳定（MSI）状态进行确认 [10] 。因此，HER2、PD-L1和dMMR/MSI-H均是晚期转移性胃癌患者在接受一线治疗前需明确评价的指标。近来，Claudin18.2靶向药物的临床获批，也将推动Claudin18.2检测普及。相信，未来将有更多的生物标志物（如FGFR2b）被纳入常规病理检测，成为临床诊疗的重要实践。

特异表达，Claudin18.2成为胃癌中颇具潜力的靶点

Claudin18.2是紧密连接蛋白（Claudin，CLDN）家族成员之一，该蛋白家族最初于1998年被首次报道，可在临近细胞间形成紧密连接通道，调控物质流通。目前Claudin18.2是研究地最透彻的紧密连接蛋白之一。

分子生物学特性： CLDN18基因位于染色体3q22区段 [11] ，编码的Claudin18蛋白由2个胞外环、4个跨膜结构域和1个细胞质结构域构成。经不同的剪切，CLDN18基因可形成CLDN18.1和Claudin18.2两种不同的剪切突变体，分别在肺组织和胃组织中表达 [12,13] 。Claudin18.2是上皮细胞间紧密连接的重要组成部分，在维持细胞极性和屏障功能，以及促进耐酸性方面发挥着重要功能。2008年，Sahin教授率先证实在正常胃组织中，Claudin18.2仅在胃黏膜上皮细胞中表达，并不暴露在外，当细胞发生癌变后，肿瘤引起的细胞极性紊乱导致Claudin18.2抗原暴露，使其可与靶向药物结合 [14] ，这一特性使得Claudin18.2有望成为胃癌中的创新治疗靶点。

Claudin18.2蛋白在胃癌中的表达：由于不同研究中选择的抗体、阳性定义、染色注释方法、肿瘤组织学/部位及样本类型（活检vs手术）等各不相同，因此，既往关于Claudin18.2阳性比例的报道大不相同。目前最大样本量分析显示，在胃/胃食管结合部腺癌中，肿瘤细胞Claudin18.2中强度膜染色≥75%的比例高达38.4%（1730/4507） [15] 。在转移性胃癌中，Claudin18.2的表达在配对的原发灶和转移灶之间有着高度一致性 [16-19] ，而Claudin18.2的表达与肿瘤分期无明显相关性 [20] 。从治疗的角度，Claudin18.2靶点与其他生物标志物如HER2、PD-L1、MMR蛋白间存在有限的表达重叠 [21-23] 。

Claudin18.2阳性胃癌的临床特征：数项回顾性研究表明，Claudin18.2阳性在低黏附性肿瘤或弥漫型胃癌中比例较高，但该相关性未被一致地证实。胃癌中存在一种CLDN18基因特殊的融合突变——CLDN18-ARHGAP，该融合占比约15% [24] 。有研究表明，携带该融合基因的患者往往与胃癌早发、弥漫型胃癌、更晚分期和更差预后相关，且通常伴随Claudin18.2的过表达 [25-27] 。

不负众望，Claudin18.2靶向治疗终成药

佐妥昔单抗（Zolbetuximab，VYLOY）是第一个靶向Claudin18.2的单抗，属于人鼠嵌合IgG1单克隆抗体，能特异性地与Claudin18.2结合，通过激活抗体依赖性细胞毒效应和补体依赖的细胞毒效应诱导肿瘤细胞凋亡。在佐妥昔单抗的临床开发过程中，Claudin18.2阳性定义被不断修正和优化，从I期临床研究中的“任意肿瘤细胞膜表达（无论表达强度）” [28-29] ，到III期SPOTLIGHT和GLOW研究中采用的“肿瘤细胞Claudin18.2中强度膜染色≥75%” [30-31] ，最终两项重磅研究均表明佐妥昔单抗联合化疗治疗Claudin18.2阳性、HER2阴性胃癌的优异疗效和良好安全性。此外，Claudin18.2阳性胃癌领域的治疗发展迅猛，创新作用机制的药物如双抗、三抗等有望更好地发挥抗肿瘤作用。

有章可循，提高Claudin18.2检测、判读流程的规范化水平

目前，免疫组织化学（IHC）检测是评估Claudin18.2表达的主要手段，但由于采用的检测抗体、判读体系不同，因此对Claudin18.2的表达在文献中差异较大。为了产生前瞻性可比数据、筛选适合接受治疗的患者，确定IHC染色和评价的流程是非常重要的。

检测抗体及平台的选择：针对Claudin18.2的IHC检测，成熟的抗体来源主要为Clone43-14A（德国Ganymed公司），Clone43-14A能识别claudin-18的C末端，并不特异性针对18.2异构体，可重复性较好 [18] 。一项环形比对研究评估了3款CLDN18抗体和免疫组化染色平台的可重复性，结果发现，Ventana CLDN18(43-14A)检测平台的检测性能（准确性、敏感性和特异性）≥95%，在27个实验室间可重复性高 [32,33] 。

充分评估Claudin18.2表达的基本要求：

1. 样本的选择： ① 选择原发灶活检样本的至少6个部位进行检测；② 仅评估侵袭性腺癌，非侵袭性或异常增生细胞不予评估；③ 评估样本至少存在50个恶性肿瘤细胞。

2.分析需求： ① Claudin18.2染色应在常规操作的、福尔马林固定、石蜡包埋组织中检测；② 未染色玻片的抗原稳定性至少能维持45天，不同实验室可根据各自验证结果适当延长；③ 由于CLDN18.1亚型在胃组织中的表达可以忽略不计，因此可以使用亚型特异性或泛claudin-18抗体，并获得较为一致的结果。

3. 染色评估： ① 根据染色强度，将Claudin18.2表达分为0（细胞膜或细胞质无反应）、1+（细胞膜或细胞质弱反应性）、2+（细胞膜或细胞质中反应性）、3+（细胞膜或细胞质强反应性）。② 为了充分评估标本，首先应在低倍镜下（x5物镜）观察，以对整个玻片的染色情况和表达异质性留下整体印象。③ 基于SPOTLIGHT和GLOW研究，Claudin18.2阳性标准为肿瘤细胞膜染色2+/3+比例≥75%，当2+/3+比例在60%~80%时，需由另一位病理医生进行再评估。④ 待测标本中的非肿瘤性胃黏膜是评估染色强度的理想内对照。

4. 结果报告： ① 检测样本的类型及部位；② 样本是否充足；③ 检测所用抗体克隆号及染色剂；④ 肿瘤细胞膜染色中度或强反应的细胞占比，阳性阈值为75%。

结语

本篇综述的前半部分为基础篇，系统地阐述了Claudin18.2的生物学特性、成药机制及免疫组化检测及判读的核心要点。目前佐妥昔单抗已在国内获批上市，为晚期Claudin18.2阳性胃/胃食管结合部腺癌患者带来生存希望，也将进一步推动国内Claudin18.2检测的可及性及判读规范性。本篇综述后半部分将从实践的角度出发，深入探讨Claudin18.2免疫组化评估的实用方法和经验，敬请期待！

本文由安斯泰来提供，仅供医疗卫生等专业人士参考
过审编号：MAT-CN-VYL-2025-00039
材料准备时间：2025-02-16
有效期至：2027-02-17

参考文献

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