分析与UD10图像分析仪相关联的Sysmex UF4000尿液细胞细菌检测的性能
摘要 目的：将 UF-4000 流式荧光细胞计数器和 UD-10 图像分析仪（Sysmex）与光学显微镜检查和培养进行比较评估。材料和方法：共纳入 2,695 份连续的患者尿液。对 316 份样本使用自动系统和 Kova 细胞显微镜进行细胞计数，并以 10 个白细胞 (WBC)/L 和 10 个红细胞 (RBC)/L 为临界值进行比较。其次，通过与培养物进行比较，选择了触发细菌警报的阈值细菌数。最后，在 362 份样本中测试了革兰氏阴性（GN?）和革兰氏阳性（GP?）警报性质的可靠性（与革兰氏染色法和培养法比较）。结果：在通过 UD-10 后，白细胞的显微镜/人工不匹配率为 8.5%，红细胞为 16% 和 6.9%。大多数误差都与接近 10 个细胞/升阈值的数量有关，而自动系统的误差往往更高。在选定的 200 个细菌/升的警报阈值下，"GN? "警报和 "GP? "警报分别与 91%/86% 和 79%/20% 的重要革兰氏/培养物（GN 杆菌和 GP 球菌）相关。结论：在细胞计数方面，自动系统与显微镜之间的相关性很好，UD-10 可以纠正差异。GN？警报 "是可靠的，可使临床医生迅速采取感染处理措施。
讨论 我们在本研究中评估了 Sysmex 4000 自动化仪的性能，它是法国最先进的流式细胞仪。该仪器是为提高细胞和微生物的观察和分析能力而开发的，采用了新的特殊荧光染料和 488 纳米半导激光器，以提高灵敏度，并配有去极化滤光片（GR/cristaux 差分）。对于细胞的测量，自动校正/光学显微镜对位于 10 个细胞/升理论值下的 UF 值非常有效。
不过，这种相关性对于超过 10 个细胞/升的细胞数来说就不那么好了
。对于国标细胞，自动测量仪给出的细胞数要远远高于显微镜下的细胞数（26 对 1），主要原因是：(1)显微镜下的细胞数与国标细胞的数量不一致；(2)显微镜下的细胞数与国标细胞的数量不一致。
这些差异都在临床意义的临界值左右。与自动方法相比，显微镜检查发现白细胞数量较高的唯一尿液还出现了血尿（200 GR/L）：因此，操作员可能将一些白细胞误认为是红细胞。由于培养液无菌且白细胞数量较少，因此没有从该尿液中提取对照样本。人工方法读数的差异只对临床意义极限的白细胞尿值有影响。这种操作员之间的差异类似于测量的不确定性，可通过计算决策阈值附近的变异系数来近似估算。使用人工方法时，该系数为 30%，而在评估血细胞比容时的变异系数为 12%。通过自动测量方法测量尿液的不稳定性，并根据尿液中的白细胞值进行计算。这些结果可以减少与光学显微镜相比的不确定性时间间隔。如果菌落计数具有显著性（白细胞计数在临床上具有显著性），则在计算 ECBU 时应考虑 10 GB/L 临界值的间隔。
在显微镜下血尿的诊断中，如果只使用 UF4000，红细胞的人工/自动差异比白细胞更常见。使用自动系统观察到的红细胞计数较高可能是由于包含了肉眼无法观察到的 "幽灵 "红细胞。换用 UD10 可以消除这些差异，因为 UD10 带有摄像头，可以恢复目测读数条件。当红细胞数量多而白细胞数量少时，UD10 会触发警报，自动进行检查。
我们对大量尿液中的细菌警报进行了研究，从而选择了 200 个细菌/升的警报值作为革兰氏染色的标准，而不是供应商预设的 150 个细菌/升的标准、 这样，我们就能获得与培养液相比更高的警报浓度，而不会增加与自动仪器到达前相比的革兰氏染色数量。虽然阳性预测值比其他两个警戒值都要高，但却不能将直接检测时出现的病菌作为尿液感染的可靠论据。
在我们的医院，所有的尿液都被封存起来，通过对病菌检测的敏感度累积来减少尿液培养并不是我们的研究目的。但某些中心倾向于在筛选过程中使用最合适的阴性粒度值，以减少培养基的数量。白细胞和细菌的等值值也是根据受试群体来选择的，这说明了它们在文献中的差异性[2, 4-7]。例如，有一个研究小组在 UF5000 上使用了较低的细菌浓度（30/L），再加上 200/L 的白细胞浓度，这样就能获得较高的敏感度和阴性假定值，从而避免无效培养 [6]。
通过比较细菌警报和革兰氏显微镜检查的性质发现，"GN? 比 "GP? ". 结果表明，在 11 个与 "GP? "的 11 个尿液中，有 10 个呈 BGN 阳性，只有一个呈 CGP 阳性，这与 "GP? "
此外，革兰氏染色法也可能出现错误，某些尿液泡沫难以解释。如果将革兰氏结果与培养结果进行比较，我们就会怀疑这一点：在 10 个标有 "GN? "的 10 个尿液中，9 个尿液呈 BGN 阳性，1 个尿液呈 CGP 阳性，这与 "GN? ". 因此，在出现 "GN? "警报的情况下，可考虑不使用自动检测系统的信息，而只对革兰氏进行检测。"
如果我们现在只比较培养的警报，那么与 "GP？"这一提示信息无法用于治疗。这种低效率在很大程度上可以解释为乳酸菌和被污染的培养物中含有大量革兰氏阳性菌。相反，在 86% 的病例中，"GN? "与 BGN 尿路感染相对应，可指导临床医生在第一时间采取适当的治疗措施。
这些与培养物的比较结果与 Geerts 等人的研究结果相似，他们发现 UF1000 自动分析仪上的 "球菌/混合 "警报与 29% 的革兰氏阳性球菌感染率无关，而与 91% 的 BGN 尿液感染率相关的 "棒状 "警报则相反 [8]。其他一些研究在评估与 UF4000 采用相同技术的 UF5000 的性能时也发现，BGN 的鉴别力高于革兰氏阳性菌 [9，10]。
最后结论：
这项研究表明，自动测量 GB 值与 Kova 细胞显微镜观察之间存在良好的相关性。尽管在自动测量值超过 10 cellsules/L 的情况下，这种相关性略微减弱，但仍略有提高，这对最终的 ECBU 分析产生了微小的影响。在显微镜下观察细胞色素沉积时，
在 UD10 上观察到的细胞色素沉积不一致的数量大大减少，从而避免了在光学显微镜下观察，并因此减少了操作和观察的时间
。此外，UF 4000 还具有识别革兰氏阴性菌的能力，可用于快速诊断革兰氏阴性菌感染，从而选择合适的抗生素治疗方法。
总体来说还是很不错的。
