羊膜中可临床应用的细胞：羊膜间充质干细胞

羊膜为半透明的薄膜，有韧性，无神经、血管、淋巴管，包裹着羊水和胎儿，提供胚胎生长发育的环境。其厚度仅0.02~0.5mm，由上皮层、基底层和基质层（结缔组织层）组成。

1

hAMSCs的来源

人羊膜间充质干细胞（ human amniotic mesenchymal stem cells ， hAMSCs ）来源于纤维母细胞层，纤维母细胞层由疏松纤维母细胞和网状纤维构成； 海绵层由波浪状网织纤维构成，具有一定的弹性。

2

hAMSCs 的生物学特性

2.1 hAMSCs 的表面标记物

2.2 hAMSCs 的分化潜能

hAMSCs 具有较为全面的分化潜能，当受到外源生长因子或化学物质等刺激时，hAMSCs 有能力向三个胚层不同组织来源的细胞分化。hAMSCs 可以表达胚胎干细胞的典型表面标记物，表明 hAMSCs 在干细胞移植治疗中具有巨大潜力。研究发现，在 DNA 去甲基化剂 5-氮杂胞苷、转化生长因子-β ( transforming growthfactor β，TGF-β) 和碱性成纤维细胞生长因子 ( basicfibroblast growth factor，bFGF) 共培养、胰岛素样生长因子-1( insulin-like growth factor-1，IGF-1) 、淫羊藿次苷 II、人血小板裂解物和 5-氮胞苷联合、人血小板裂解物的诱导下，hAD-MSCs 可分别分化为骨骼肌细胞、人前交叉韧带成纤维细胞、胰岛分泌细胞、多巴胺能神经元样细胞、心肌细胞和内皮细胞。其中，多巴胺能神经元样细胞属于外胚层，骨骼肌细胞、人前交叉韧带成纤维细胞和心肌细胞属于中胚层，胰岛分泌细胞属于内胚层。

2.3 hAMSCs 的免疫调节性

hAMSCs在体外的形态与成纤维细胞相似，表现为梭形。hAMSCs 表面表达有 CD44、CD73、CD90 和CD105 等多种干细胞标志物，但不表达CD34、CD45、CD11B、CD19 和 HLA⁃DR 这体现出hAMSCs具有良好的细胞干性及低免疫原性。hAMSCs是细胞因子的丰富来源，可通过旁分泌作用释放各种细胞因子从而起到促进组织修复及调节免疫反应的作用。

2.4 hAMSCs 的旁分泌作用

hAMSCs 的免疫调节活性借助旁分泌作用来实现。hAD-MSCs 通过分泌生长因子、血管生成相关因子等多种细胞因子，如血管内皮生长因子( vascularendothelial growth factor，VEGF) 、成纤维细胞生长因子2( fibroblast growth factor 2，FGF-2 ) 、肝细胞生长因子( hepatocyte growth factor，HGF)、血小板衍生生长因子( platelet derived growth factor，PDGF) 、IGF-1 等，促进细胞分化、血管生成和组织再生。hAMSC也可分泌IL-6，IL-8、单核细胞趋化因子-1 ( monocytechemotactic protein，MCP-1 ) 、基质细胞衍生因子-1α( stromal cell-derived factor 1α，SDF-1α) 等多种趋化因子。

3

hAMSCs 的临床研究方向

3.1免疫系统

免疫系统在人体起到了免疫监视、防御、调控的作用，免疫系统失衡往往导致多种疾病的发生。hAMSCs可通过分泌可溶性细胞因子抑制单核细胞增殖，降低T细胞功能和NK细胞毒性，并通过抑制肿瘤坏死因子⁃α、白细胞介素和干扰素γ 等细胞因子的分泌来抑制组织局部炎症的发生在适应性免疫中，hAMSCs可以通过抑制干扰素调节因子4、PR／SET结构域 1、X⁃盒结合蛋白1的基因表达，阻断B细胞分化及CD138＋浆细胞的生成。综上，hAMSCs 能通过调节免疫系统有效抑制炎症的发生。

3.2 生殖

妇科疾病 POF 是指 40 岁之前出现卵巢功能下降甚至卵巢衰竭的现象，其特点是促性腺激素水平升高和雌激素水平降低，伴随潮热、出汗和性欲低下等一系列低雌激素症状 。研究证实， hAMSCs 能够抑制颗粒细胞( granulosa cell，GC) 凋亡，促进血管生成，并激活 P13K/Akt 信号通路，促进 SDF-2 /CXCＲ4 轴介导的迁移和归巢，将 hAMSCs 归巢至卵巢，促进分泌VEGF 和血管内皮生长因子受体 2( vascular endothelial growth factor receptor 2，VEGFＲ2 ) ，进而提升卵巢功能。此外，hAESCs 以旁分泌方式显著抑制化疗诱导的细胞凋亡并激活颗粒黄体细胞的 TGF-β /Smad 信号通路，增加卵巢中次级和成熟卵泡的数量，促进受损卵巢的血管生成 。

宫腔粘连( IUA) 多是因宫腔手术创伤或感染导致子宫内膜基底层受损，使得子宫壁间相互粘连，宫腔闭塞，从而导致月经量减少、闭经甚至不孕等。研究发现，在 IUA 大鼠模型中移植hAESCs 能够上调 VEGF、bFGF 和 IGF 等生长因子以及 雌激素受体、 IL-4 的水平，下调 I 型胶原蛋白、金属蛋白酶组织抑制剂 -1 ( TIMP 1) 、 TGF-β 、 α- 平滑肌肌动蛋白 ( α-SMA) 、血小板衍生生长因子 ( PDGF) 以及 TNF-α 和 IL-1β 等促炎因子的表达，抑制纤维化进程，促进增殖和血管生成， 此外 激活 Notch 信号 能够加速 hAD-MSCs 向子宫内膜上皮细胞的分化，促进子宫内膜的修复和再生。

3.3 神经系统损伤

淀粉样蛋白⁃β 肽（Ａβ）的沉积是导致阿尔茨海默病发生发展的重要原 因。 hAESCs 可以促进阿尔茨海默病模型鼠中小胶质细胞的活化，增强其对 β⁃淀粉样蛋白的吞噬能力，另一方面通过旁分泌作用下调TNF⁃α 和IL⁃１β 等炎症因子表达，调节局部炎症反应。通过注射高表达脑源性神经营养因子基因的 hAESCs