HPLC常用试剂——三氟乙酸

一、三氟乙酸的理化性质

1. 物理性质：

• 外观：无色透明液体，有刺激性气味。

• 分子量：114.02
  

• 沸点：约72°C（挥发性强，易蒸发）。

• 溶解性：与水、甲醇、乙腈 、乙醇 等多数有机溶剂混溶。

• 密度：1.535 g/cm³（比水重）。

• 强酸性：pKa≈0.23，酸性远强于乙酸（pKa≈4.76），接近硫酸。

• 腐蚀性：对金属、玻璃、橡胶等材料有腐蚀作用。

• 稳定性：高温下可能分解，释放有毒气体（如氟化氢、碳酰氟）。

• 反应性：

  ①与碱反应生成三氟乙酸盐。

  ②可参与酯化、酰胺化、脱保护基等有机反应。

  
  

二、在HPLC中主要作用

1. 调节流动相pH值，控制分析物离子化状态：

• TFA的强酸性（pKa≈0.23）可显著降低流动相的pH（通常调至1.5-3），抑制酸性或碱性化合物的离子化，增强其在反相色谱柱上的保留。

• 对于含氨基、羧基等官能团的分子（如多肽、蛋白质），低pH环境可减少电离，降低亲水性，从而提高保留时间和分离效率。

• TFA的疏水性三氟甲基（CF₃⁻）可与带正电荷的分子（如质子化的氨基）形成离子对，增强疏水性，延长保留时间。

• 常用于分离极性较大的碱性化合物（如生物胺）。